方阵滴定确定*佳条件时,为什么选择OD值在1.0左右

方阵滴定确定*佳条件时,为什么选择OD值在1.0左右

一般现在酶标仪OD*大测到3左右，所以只要不高于这个就可以，保险起见，可选择2.0左右OD区间大，ELISA的工作浓度范围也自然大点.

个人觉得棋盘ELISA一定要选择OD1.0的点是个误区。首先不同型号的灵敏度应该是不一样的；其次OD为1.0指的是某个抗原抗体浓度条件下的OD值，并不代表通过此次棋盘得到的*佳抗原抗体的浓度所做的各种后续ELISA实验的值也是1.0左右，所以说选择处于酶标仪灵敏度的*佳状况并不一定符合后续的实验。（不善表达，不知自己描述清楚没有）

我自己觉得要根据不同的实验类型（间接，双抗夹心或是竞争等）来选择*佳抗原抗体工作浓度。象竞争ELISA，做棋盘的目的是包被抗原和一抗的量，试想如果包被抗原太浓，意味着需要竞争抗原浓度也不能小（毕竟是竞争对手不能悬殊太大），这就注定了竞争ELISA的检测限不好（因为竞争抗原往往是要检测的东西，所需浓度越大IC50也就越大）。而一抗也不能足量，否则即能与包被抗原反应又能与检测抗原反应，就不能称为竞争ELISA了。也不能太少，否则整体OD读数太低。

双抗夹心ELISA也是同样的道理，找到包被抗体和酶标抗体的平衡点，即能OD与本底之间的平衡点。