产品详情
  • 产品名称:平板计数琼脂(PCA)

  • 产品型号:Plate Count Agar/ Standard Methods Agar
  • 产品厂商:KALANG
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简单介绍:
平板计数琼脂(PCA)用于**总数测定平板计数琼脂(PCA)由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被**污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
详情介绍:

平板计数琼脂(PCA)

产品详情

用于**总数的测定

平板计数琼脂(PCA) 1KG

组成(1000ml):

胰蛋白胨

5.0g

葡萄糖

1.0g

酵母浸粉

2.5g

琼脂

15.0g

pH7.0±0.2(25℃)

用法:

称取本品23.5g于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,分装,121℃高压**15分钟,**结束后请摇匀,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固,备用。

质控方法:

理化检测

干粉(淡黄色);水分(≤5%);溶液(淡黄色,澄清透明);

强度(350~500g/cm2);pH(7.0±0.2)

生长检测

以合格品为对照,倾注操作,计数相差10%内,36±1℃培养48±2小时

划线金黄色葡萄球菌与铜绿假单胞菌,有色素产生

菌种名称

接种量

生长特征

大肠埃希氏菌ATCC25922

30~150CFU

菌落直径与对照相仿,计数相差10%以内

金黄色葡萄球菌ATCC25923

30~150CFU

产黄色色素,菌落直径与对照相仿,计数相差10%以内

枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501

30~150CFU

菌落直径与对照相仿,计数相差10%以内

铜绿假单胞菌ATCC27853

30~150CFU

产绿色色素,菌落直径与对照相仿,计数相差10%以内

奇异变形杆菌ATCC12453

30~150CFU

菌落直径与对照相仿,计数相差10%以内

自来水

30~300CFU

菌落直径与对照相仿,计数相差10%以内

平板计数琼脂(PCA)使用方法:

称取本品15.0g于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,分装,121℃高压**15分钟,备用。

常用培养基及基本特性

1、RPMI-1640 Medium

RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成**细胞、T细胞**瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。

2、Minimum Essential Medium(MEM)

也称*低必需培养基,它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。成分简单,可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型,而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。

3、DMEM-高糖(标准型)是一种应用十分广泛的培养基,平板计数琼脂(PCA)可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。

4、DMEM-低糖(标准型)是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。

5、DMEM/F12

DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂,含有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM/F12培养基(DME/F12medium),作为开发无血清配方的基础,以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。平板计数琼脂(PCA)为了增强该培养基的缓冲能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mMHEPES缓冲液。

6、McCoy’s 5A

McCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代移植物的生长,除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些**细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人**细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。

7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM)

Guilber 和Iscove将Dulbecco’Medium 改良为 Iscove’s Medium,用于培养红细胞和巨噬细胞前体。此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES。并用硝酸钾取代了硝酸铁。IMDM还能够促进小鼠B**细胞,LPS刺激的B细胞,骨髓造血细胞,T细胞和**瘤细胞的生长。IMDM为营养非常丰富的培养液,因此可以用于高密度细胞的快速增殖培养。

8、M-199 Medium

1950年,Morgan成功研制出具有确定化学成分的细胞培养液,即M-199,主要用于鸡胚成纤维细胞培养。平板计数琼脂(PCA)此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。M-199可用于培养多种种属来源的细胞,并能培养转染的细胞。

9、Leibovitz Medium (L-15)

L-15培养液适用于快速增殖瘤细胞的培养,用于在CO2缺乏的情况下培养肿瘤细胞株。此培养液采用磷酸盐缓冲体系,氨基酸组成进一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖。

10、Ham’s F-10培养基:适应小鼠细胞、人类二倍体的培养。

11、Ham’s F-12培养基:可以在加入很少血清的情况下应用,特别适合单细胞培养和克隆化培养,是无血清培养中常用的基础培养液。

12、William’s Medium E:用于大鼠肝上皮细胞的长期细胞培养。

13、MCDB 131 培养液:用于培养内皮细胞。

14、Opti-MEM I Reduced Serum Media:用于培养造血细胞。

15、植物血凝素(PHA):增加细胞转化和DNA合成。

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