人胃癌细胞
货号KL-003
简称 MKN-45
细胞数 1×106
规格 1ml/T25
价格 询价
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。
详细描述 Description
人胃癌细胞
细胞介绍
该细胞系由S Akiyama建立，源于一位35岁患有印戒细胞癌的女性的胃**结。
细胞特性
来源：胃癌
形态：圆形，贴壁生长
含量：>1x106个/mL
污染：支原体、**、酵母和**检测为阴性
规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
人胃癌细胞
细胞接受后的处理：
收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的完全培养基。
如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
细胞用途：仅供科研使用。
人胃癌细胞
本公司的细胞培养操作规程，供参考
一．培养基及培养冻存条件准备：
准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号C11875500bt, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，80%；上等胎牛血清，20%。
培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
细胞处理：
复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。**天换液并检查细胞密度。
人胃癌细胞细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。
移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行，*后的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心，用血清重悬浮，加DMSO至*终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
