产品详情
  • 产品名称:人肺动脉内皮细胞

  • 产品型号:HPAEC
  • 产品厂商:KALANG
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简单介绍:
人肺动脉内皮细胞生长状态良好的细胞,在一般显微镜下观察时可见,细胞透明度大、折光性强、轮廓不清。细胞生长不佳时,轮廓增强,胞质中常出现空泡、脂滴和其他颗粒状物,细胞之间空隙加大,细胞形态可变得不规则甚至失去原有特点,如上皮细胞变成类上皮细胞等,人肺动脉内皮细胞活性好、存活率高,无**、**和支原体污染。细胞到达客户手中,7天内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司可以免费再向客户提供一次。
详情介绍:

人肺动脉内皮细胞

HPAEC

货号:KL-009

细胞特性

1)来源:人,肺动脉内皮

2)形态:上皮细胞样,贴壁生长

3)含量:>1x106个/mL

4)污染:支原体、**、酵母和**检测为阴性

5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

人肺动脉内皮细胞运输和保存:使用含有上等胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后,可在1000RPM,常温条件下,离心5min后,于洁净操作台弃去上清,加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途:仅供科研使用。

人肺动脉内皮细胞培养步骤

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备DMEM-H培养基(GIBCO,货号1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;上等胎牛血清,10%。也可根据实验需要选择悬浮培养基,使293T细胞悬浮生长。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。**天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

人肺动脉内皮细胞对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。

人肺动脉内皮细胞注意事项:

1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要**后方能丢弃。

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